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產(chǎn)品簡介

人軟骨寡聚蛋白

人軟骨寡聚蛋白

價格:

采購度:396    原產(chǎn)地:美國

發(fā)布時間:2012/2/6 14:12:23

上海恒遠生物代理美國進口分裝、原裝ELISA“人軟骨寡聚蛋白”,現(xiàn)貨供應(yīng),物美價廉。中英文雙版說明書,提供免費代測服務(wù)。需要產(chǎn)品以及其它詳細信息請直接聯(lián)系我司在線人員或業(yè)務(wù)人員。

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標簽:人軟骨寡聚蛋白   人COMP   elisa代理商   

詳細信息

產(chǎn)品名稱:人軟骨寡聚蛋白    
英文名稱:Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA KIT 
性狀:液體     
適應(yīng)癥:科研     
規(guī)格:96人份/48人份     
貯藏:2-8℃     
檢測方法:ELISA酶聯(lián)免疫     
產(chǎn)品用途: For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務(wù).
試劑器材
  1. 試劑
  (1) 包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
    NaCO31.59克 NaHCO3  2.93克  加蒸餾水至1000ml  
    (2) 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4?12H2O 2.9克 NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
  (3) 稀釋液:牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5~10%使用。
  (4) 終止液(2M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
 。5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml。
 。6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml底物緩沖液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl
 。7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl
 。8) 抗原、抗體和酶標記抗體。
 。9) 正常人血清和陽性對照血清。
  2. 器材:
 。1) 聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
 。2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
 。3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
注意事項
  1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以實驗結(jié)果的性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
  2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
 。1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
 。2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
 。3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里地滴定其工作濃度。
  (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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更新時間:2024/12/23 9:37:33

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