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人巨噬細(xì)胞刺激蛋白

人巨噬細(xì)胞刺激蛋白

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采購(gòu)度:429    原產(chǎn)地:美國(guó)

發(fā)布時(shí)間:2012/2/6 14:12:23

上海恒遠(yuǎn)生物代理美國(guó)進(jìn)口分裝、原裝ELISA“人巨噬細(xì)胞刺激蛋白”,現(xiàn)貨供應(yīng),物美價(jià)廉。中英文雙版說(shuō)明書,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要產(chǎn)品以及其它詳細(xì)信息請(qǐng)直接聯(lián)系我司在線人員或業(yè)務(wù)人員。

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標(biāo)簽:人巨噬細(xì)胞刺激蛋白   人MSP   elisa代理商   

詳細(xì)信息

產(chǎn)品名稱:人巨噬細(xì)胞刺激蛋白    
英文名稱:Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA KIT 
性狀:液體     
適應(yīng)癥:科研     
規(guī)格:96人份/48人份     
貯藏:2-8℃     
檢測(cè)方法:ELISA酶聯(lián)免疫     
產(chǎn)品用途: For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù).
試劑器材
  1. 試劑
 。1) 包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
    NaCO31.59克 NaHCO3  2.93克  加蒸餾水至1000ml  
    (2) 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4?12H2O 2.9克 NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
 。3) 稀釋液:牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5~10%使用。
 。4) 終止液(2M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
  (5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml。
  (6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇) 0.5ml底物緩沖液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl
 。7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl
  (8) 抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
 。9) 正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。
  2. 器材:
 。1) 聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,ELISA檢測(cè)儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
  (2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
 。3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
注意事項(xiàng)
  1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
  2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
  (1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
 。2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
  (3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里地滴定其工作濃度。
  (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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更新時(shí)間:2024/12/23 9:37:33

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